| Sumario: | Propósito y Método de Estudio: El cáncer es un crecimiento tisular producido por la proliferación
continua de células anormales con capacidad de invasión y destrucción de otros tejidos, que puede
originarse a partir de cualquier tipo de célula, en cualquier tejido corporal. A nivel mundial el cáncer
es una de las principales causas de mortalidad. En México, ocupa el tercer lugar con 128,000 casos en
2012. Aunado a ello, los tratamientos antineoplásicos son invasivos, dolorosos y presentan múltiples
efectos adversos, además de no ser siempre efectivos. Esto ha llevado a la búsqueda de nuevos
fármacos, que puedan ayudar al tratamiento contra esta enfermedad. En estudios recientes se ha
demostrado la actividad anticancerígena de compuestos derivados de azetidin-2-onas. Por lo tanto en
este proyecto se planteó como objetivo evaluar el efecto celular y molecular de 16 compuestos
derivados de 3-fenoxi y 3-metoxi-N-(metoxi-fenil)-azetidin-2-onas sobre las líneas celulares SiHa,
Chang y B16F10. La evaluación de la actividad citotóxicain vitro, se realizó en células SiHa, Chang y
B16F10, a través de la técnica de WST-1, donde se determinó el porcentaje de viabilidad celular a
diferentes concentraciones: 10, 1, 0.1 y 0.01 μM de cada uno de los compuestos en estudio. Con los
resultados de viabilidad se calculó el porcentaje de citotoxicidad, y se determinó la concentración
inhibitoria media (CI50) del crecimiento celular de cada uno de los compuestos.Se evaluó la actividad
de Caspasa-3 mediante un ensayo de ELISA para determinar la presencia de apoptosis inducida por
los compuestos. Finalmente para complementar el estudio a nivel molecular,se analizaron los
patrones de expresión genética inducidos por el compuesto C-089 en células B16F10, a través de un
microarreglo de DNA de ratón y se realizó un ensayo in silico de Docking para evaluar las posibles
interacciones moleculares de los compuestos con blancos terapéuticos conocidos.
Contribuciones y Conclusiones.Se observó que el compuesto C-089 presentó una actividad
citotóxica en células SiHa con un valor deCI50 = 0.07262 μM y en células murínicas B16F10 con un
valor de CI50 = 1.214 μM; sin embargo, en células Chang el valor de CI50 fue >10.00 μM. Estos datos
nos muestran una selectividad sobre las líneas celulares, la cual no está presente en el control
Vincristina. Posteriormente, al realizar el ensayo de Caspasa-3, en células B16F10, sedemostró que
los compuestos derivados de azetidin-2-ona presentan una actividad apoptótica al igual que la
podofilotoxina. Finalmente, Los resultados del análisis molecular por microarreglos y
dockingmuestran que el compuesto C-089 está involucrado en la sobre expresión de genes
específicos de la regulación delcitoesqueleto y la apoptosis, encontrándose inhibidos algunos genes
del ciclo celular.
En conclusión, el compuesto C-089 presentó la mayor selectividad hacia células neoplásicas, además
de comprobar por la determinación de caspasa-3 que es inductor de la apoptosis. Se determinó a
través de un análisis de la expresión génica que las vías metabólicas involucradas en la actividad
biológica inducida por este compuesto son principalmente el ciclo celular, la apoptosis y el
citoesqueleto. Y a través del ensayo de acoplamiento molecular se demostró una posible interacción
con la β-Tubulina.
|
|---|
