| Sumario: | La tuberculosis afecta a aproximadamente un tercio de la población mundial. En el año
2017 se reportaron 10 millones de casos y 1.3 millones de muertes. El tratamiento de esta
enfermedad se lleva a cabo por 6 meses con los fármacos de primera línea isoniazida,
rifampicina, pirazinamida y etambutol; sin embargo, su eficacia ha disminuido debido a
la aparición de cepas resistentes. La resistencia a fármacos en Mycobacterium
tuberculosis, el agente causal de la enfermedad, se ha vinculado principalmente a
mutaciones en genes específicos, pero esta relación no se cumple en todos los casos. En
base a estos antecedentes nuestro grupo de trabajo realizó una comparación de la
expresión genética entre una cepa sensible y una multifármacorresistente, en donde
diversos genes mostraron una expresión diferencial. Dentro de estos genes se encuentran
los genes esxG y esxH, los cuales mostraron un aumento en la expresión en la cepa de M.
tuberculosis resistente a fármacos de primera línea. Los genes esxG y esxH forman parte
del clúster Esx-3 que codifica para un sistema de excreción tipo VII; específicamente estos
genes codifican para proteínas que son secretadas por este sistema. El objetivo del presente
proyecto es evaluar la contribución de los genes esxG y esxH al fenotipo de
farmacorresistencia en M. tuberculosis, inhibiendo estos genes en M. smegmatis como
modelo experimental de M. tuberculosis. Se utilizó la tecnología del RNA antisentido para
inhibir dichos genes en M. smegmatis, confirmando su inhibición mediante la
cuantificación de la amplificación de dichos genes (utilizando el software ImageJ), a partir
del cDNA obtenido de la extracción del RNA total de la cepa con los genes inhibidos, se
observó una inhibición del 40% en comparación con la cepa control. El efecto de la
inhibición de los genes en la resistencia a fármacos se evaluó utilizando el método de
REMA. Se observó un aumento en la resistencia a isoniazida en la cepa de M. smegmatis
con los genes inhibidos en comparación con la cepa control; mientras que en rifampicina
y etambutol no se observaron cambios en el umbral de resistencia.
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