Aislamiento y caracterización de un inmunógeno asociado al linfoma L5178Y
Los antígenos tumorales representan el punto partida en el desarrollo de estrategias para la prevención, diagnóstico, monitoreo y tratamiento del cáncer y por ello, es de gran interés biomédico su aislamiento, así como las metodologías que para ello se emplean. En este trabajo usamos herramientas pr...
| Autor principal: | |
|---|---|
| Formato: | Tesis |
| Lenguaje: | Spanish / Castilian |
| Publicado: |
2008
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| Materias: | |
| Acceso en línea: | http://eprints.uanl.mx/20835/1/1020164009.pdf |
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| author | Caballero Hernández, Diana Elia |
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| description | Los antígenos tumorales representan el punto partida en el desarrollo de estrategias para la prevención, diagnóstico, monitoreo y tratamiento del cáncer y por ello, es de gran interés biomédico su aislamiento, así como las metodologías que para ello se emplean. En este trabajo usamos herramientas propias de la proteómica como la electroforesis bidimensional, análisis de imagen asistido por computadora, Western blotting y espectrometría de masas para la definición de los antígenos asociados al linfoma murino L5178Y. Se llevó a cabo el análisis comparativo de los patrones bidimensionales de expresión de proteínas de membrana de las células tumorigénicas L5178Y-R y su contraparte no tumorigénica L5178Y-S; establecimos los mapas de referencia para ambas líneas y encontramos diferencias en el patrón de expresión de proteínas, que hacen distintivo el perfil de membrana de cada una de estas líneas.
Adicionalmente, aprovechamos la respuesta inmune humoral contra tumores de animales inmunizados con ambas líneas para detectar antígenos potenciales en ensayos de inmunodetección. De esta forma identificamos una forma inmunogénica de la proteína sérica alfa-2-HS-glicoproteína asociada a la línea celular L5178Y-R, pero no a la sub-línea no tumorigénica L5178Y-S. Se requieren estudios adicionales para establecer el papel que juega esta forma inmunogénica de fetuina en la tumorigénesis del linfoma L5178Y-R y si esta fetuina inmunogénica se encuentra en otras formas de cáncer.
Abstract
Tumor antigens hold great promise to develop strategies in cancer prevention, diagnosis, monitoring and treatment. In the present thesis work we applied proteomic tools such as two-dimensional electrophoresis, computer assisted image analysis,
Western blotting, and mass spectrometry, to define the antigens associated to the murine lymphoma L5178Y. In was performed comparative analysis of two-dimensional patterns of membrane proteins for the tumorigenic cells L5178Y-R (LY-R) and the non
tumorigenic L5178Y-S (LY-S). The reference proteomic maps for both cell lines showed differences in protein expression patterns that make distinctive the membrane profile for each cell line. Auto-antibodies raised against LY-R and LY-S cells were employed to detect potential antigens in the surface of these cells in immunodetection assays. Through this approach it was detected an immunogenic form of alpha-2-HSglycoprotein, also known as fetuin-A, on LY-R lymphoma cells. Fetuin-A was
recognized by antibodies present in the serum of LY-R tumor-bearing and immunized mice, but not by sera of mice immunized with the non-tumorigenic variant LY-S or by healthy mouse serum. Further analysis is needed in order to establish the role that immunogenic fetuin-A plays in tumorigenesis of this lymphoma and if this immunogenic form is relevant to others types of cancer. |
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