Detección múltiple de las mutaciones KDR V410L, V1016I y F1534C en poblaciones de Aedes aegypti (L.) resistentes a insecticidas piretroides
Aedes aegypti L. es el principal vector de las arbovirosis en México llegando a transmitir dengue, Chikungunya, Zika y Fiebre amarilla. Los insecticidas químicos son de uso preferente para evitar la proliferación del mosquito, y por ende las enfermedades. A tal extremo se ha llevado el uso de est...
Autor principal: | |
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Formato: | Tesis |
Lenguaje: | inglés |
Publicado: |
2020
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Materias: | |
Acceso en línea: | http://eprints.uanl.mx/19254/1/1080313643.pdf |
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author | Mora Jasso, Esteban de Jesús |
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description | Aedes aegypti L. es el principal vector de las arbovirosis en México llegando a transmitir
dengue, Chikungunya, Zika y Fiebre amarilla. Los insecticidas químicos son de uso preferente
para evitar la proliferación del mosquito, y por ende las enfermedades. A tal extremo se ha
llevado el uso de este método que ha provocado la selección de mutaciones en el sitio blanco
de acción que confieren resistencia a insecticidas, lo que complica aún más el control del
vector. Mediante el uso de herramientas genéticas se ha detectado que esta resistencia al
derribo (kdr) se debe a cambios puntuales dentro del gen para del canal de sodio dependiente
de voltaje. Se analizó el genotipo individualmente para cada mosquito por AS-PCR con
oligonucleótidos específicos para cada mutación kdr V410L, V1016I y F1534C en 25
poblaciones de Ae. aegypti (L). del este y sur de México, México, se incluyó una población de
Belice. De las poblaciones genotipadas se seleccionaron diez las cuáles fueron sometidas a
bioensayos con permetrina, deltametrina y transflutrina. Una vez que se comprobó la
resistencia de las poblaciones de Ae. aegypti, dio bases para proseguir con el proceso de la
detección múltiple de estas mutaciones. Se estandarizó una PCR multiplex para las tres
mutaciones y se validó por comparación con los resultados previos del genotipado individual.
Los resultados de genotipado individual mostraron altas frecuencias de las tres mutaciones kdr
en las poblaciones seleccionadas con frecuencias de 0.12 a 0.98 para I1016, 0.19 a 0.95 para
L410 y con mayores frecuencias para C1534, encontrándose fija en nueve de las 25
poblaciones. Las poblaciones resultaron resistentes a los tres piretroides. En caso de permetrina
solo una de las diez poblaciones analizadas exhibió susceptibilidad, para la deltametrina dos
poblaciones exhibieron susceptibilidad y el resto resistencia y para el caso de transflutrina, un
piretroide de reciente introducción también se registró resistencia en el 80% de los casos. Los
resultados de la validación mostraron un 100% de concordancia entre la PCR multiplex y la
AS-PCR mostrando alta sensibilidad y especificidad. Nuestro método es el primero diseñado
para el genotipado múltiple de las tres mutaciones kdr en Ae. aegypti en México, V410L,
V1016I y F1534C. Con esta estrategia se podrán llevar a cabo en un análisis exhaustivo de la
frecuencia de mutaciones kdr en las poblaciones del vector con una precisión adecuada y con
una reducción en tiempo y costo considerable al análisis individual de cada mutación kdr. |
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