| Sumario: | Se describe el desarrollo de un inmunoensayo para la localización in situ de inclusiones virales inducidas por el virus tristeza de los cítricos (Citrus tristeza virus =CTV) mediante microscopía de luz con anticuerpos preparados contra la proteína recombinante p20 no estructural del CTV. Se emplearon cortes manuales de aproximadamente 100 ìm de grosor a partir de corteza de varetas de plantas de cítricos sanas e infectadas por el CTV. Los cortes se fijaron en 70 % de etanol y se incubaron subsecuentemente con anticuerpos anti-p20 desarrollados ya sea en rata o conejo en diluciones de 1:5,000 y 1:10,000 y 1:1,000 y 1:3,000 respectivamente, y con conjugados comerciales IgG anti-especie en diluciones de 1:30,000 para cada uno de ellos, agregando al final la solución cromogénica compuesta por NBT/BCIP. Las inclusiones
virales se visualizaron en un microscopio de luz a 10 y 40
aumentos en forma de áreas irregulares con coloración azul
obscura en el área del floema y fibras del floema en cortes
efectuados con plantas infectadas por el CTV; los tejidos
provenientes de plantas sanas no presentaron ningún tipo de
coloración, lo que permitió discriminar plantas sanas e
infectadas por el CTV.
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